细菌蛋白提取试剂盒（免超声）

简要描述：产品概述 product description 贝博® BBproExtra® 细菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌，可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳等下游蛋白研究实验。本试剂盒提取的蛋白为不具有天然活性的蛋白。本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2025-01-01
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蛋白质生物学

蛋白提取和裂解细胞器分离蛋白纯化蛋白质浓缩和缓冲液置换蛋白定量蛋白凝胶电泳免疫组织化学查看全部产品

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详细介绍

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。 2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。 3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

细菌

产品特点

1.使用方便：不需昂贵设备。 2.可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。 3.将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。 4.采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。 5.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 6.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 7.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 8.本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机 2.振荡器 3..涡旋混匀器 4.移液器 5..冰箱 6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液 2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管 2.吸头 3.一次性手套

使用注意事项

1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。 2.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。 3.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 4.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。 5.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 6.本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含EDTA，根据需要可自行加入。

使用方法

1.提取液的准备：根据所需要提取的样本量，每500 μl裂解液中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物和2 μl磷酸酶抑制剂混合物和5 μl蛋白稳定液，充分混匀后置冰上备用。 2.在4℃， 10000×g条件下将菌液离心5 min，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体。 3.用PBS洗菌体一次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。 4.按每50-100 mg湿重菌体样本加入250-500 μl提取液，吹打混匀，2-8℃振荡45-60分钟。 5.在4℃， 12000×g条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。 6.即得到细菌总蛋白样品。 7.将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。

常见问题分析

1.蛋白浓度低？处理部分样本时可能没有裂解，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。有些革兰氏阳性菌可能较难裂解，有条件的话进行超声处理。 2.用什么方法定量蛋白？建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。 3.提取时出现胶状沉淀？蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。不检测和基因组DNA结合特别紧密的特定蛋白的情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10秒间隔10秒，超声3分钟，随后离心取上清用于后续实验。 4.提取的蛋白具有活性吗？本试剂盒含有破坏蛋白天然结构的组份，有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白无法保持其天然构象和活性。需要活性蛋白的可以选择贝博其它货号的试剂盒产品。

参考文献

1.HaiFeng Su et al. An integrated approach combines hydrothermal chemical and biological treatment to enhance recycle of rare metals from coal fly ash Chemical Engineering Journal 2020 （IF=8.355） 2.HF Su et al. A sequential integration approach using Aspergillus Niger to intensify coal fly ash as a rare metal pool Fuel 2020 （IF=5.128） 3.H Shi et al. Highly efficient visible light driven photocatalytic inactivation of E. coli with Ag QDs decorated Z-scheme Bi2S3/SnIn4S8 composite Applied Catalysis B: Environmental 2019 （IF=11.698）

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