植物种子蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

简要描述：产品概述 product description 贝博TM BBproExtraTM植物种子蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种高淀粉含量的植物种子样品中提取可溶性蛋白。如水稻、荞麦、玉米、小麦等。提取过程简单方便。本试剂盒提取的蛋白样本不含有高浓度的盐成分，可直接用于等电聚焦、双向电泳，如下游实验需要直接用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验，请使用贝博其他货号的试剂盒。

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2025-01-01
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CLASSIFICATION

蛋白质生物学

蛋白提取和裂解细胞器分离蛋白纯化蛋白质浓缩和缓冲液置换蛋白定量蛋白凝胶电泳免疫组织化学查看全部产品

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详细介绍

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

双向电泳

适用样本

植物种子

产品应用

双向电泳

仪器准备

1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管
2.吸头
3.一次性手套

使用注意事项

使用注意事项：
 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。


使用方法

1. 将适量待提取种子样本剥皮，用PBS或纯水洗涤3次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入500ul蛋白提取液A充分混匀。移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-60分钟。
5. 在4℃，15000g离心20分钟。
6. 收集上清，弃沉淀。
7. 取5ml离心管，加入500ul离心上清，再加入2ml试剂B，500ul试剂C，1.5ml试剂D，涡旋20秒充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃，11000g条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃，收集中下层含蛋白层。
11. 在4℃，15000g以上条件下离心20分钟。
12. 弃上清，收集沉淀。
13. 用50－200ul试剂E充分溶解蛋白沉淀。
14. 在4℃，12000g条件下离心20分钟。
15. 收集上清用于下游实验。

常见问题分析

1.蛋白浓度低？
部分植物种子蛋白丰度极低，在条件允许的情况下，需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂E中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。

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