RIPA裂解液（不含triton x-100）

简要描述：产品概述 product description 贝博RIPA裂解液采用优质原料配制，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。本RIPA裂解液成分为25mM Tris•HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根据相应实验要求添加自己需要的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2025-01-01
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CLASSIFICATION

蛋白质生物学

蛋白提取和裂解细胞器分离蛋白纯化蛋白质浓缩和缓冲液置换蛋白定量蛋白凝胶电泳免疫组织化学查看全部产品

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详细介绍

保存温度

2-8℃

注意事项

1.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

1年

检测方法

WB、IP等

适用样本

细胞、组织

产品应用

WB、IP等

仪器准备

1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.匀浆机/匀浆器

试剂准备

1.PBS缓冲液（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

 离心管
 吸头
 一次性手套

使用注意事项

1.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2.整个过程须保持样品处于低温状态。
3.本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
4.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
5.禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
6.使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并清除残留清洁剂。
7.避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用方法

A．细胞裂解
1. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液（每106个细胞，大约10mg或10ul压积，加100ul RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一个75 cm2培养瓶加1 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
4. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

B．组织裂解
1. 取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
3. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。

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